1.简介
本文介绍了“HIGHSKY-02”水质分析仪荧光分析食品，饲料以及原料中的硒含量。.
0.100g硒测量浓度范围是0,1-100?g/kg.在未稀释的情况下硒浓度含量0.01-0.5?g。如果浓度值高于此，稀释溶液。
2.测量方法,辅助设备，试剂和材料
在铍浓度分析过程中会用到下列测试方法，试剂，附属设备，试剂和溶液。
2.1.测量方法
•水质分析仪“HIGHSKY-02”
实验室天平量程20和200g,精度-.1mg
沙浴或电炉水浴
•普通试纸
•分液漏斗,100cm3
•实验室漏斗,25和50cm3
量瓶,50,100,250,1000cm3,2-精度等级
•移液漏斗（尖头）,2和10cm3,2-精度等级
耐热烧杯,100–150cm3,
表水晶玻璃
•量筒,10和25cm3
无灰滤纸,“白色标签”
•蜡笔
2.2.试剂
2.2.1.
•蒸馏水
•2,3-二氨基萘,分析纯
•乙二胺四乙酸钠分析纯
•正己烷，分析纯
•硝酸（1,40g/cm3），分析纯
•盐酸id（1,19g/cm3）,分析纯
•硫酸（1,83g/cm3）,分析纯
•氯酸，分析纯
•氨水,分析纯
•金属硒，分析纯或硒离子标准溶液
2.3.溶液的准备
2.3.1.乙二胺四乙酸浓度，2%
稀释2g乙二胺四乙酸溶液于100cm3蒸馏水，用“白色标签”过滤器过滤.
2.3.2.氨水浓度，10%.
用蒸馏水稀释400cm3氨水（浓度–25%）至1000cm3.
2.3.3.盐酸，质量浓度0,1mol/dm3.
将8,3cm3浓盐酸，蒸馏水稀释至1000cm3.
2.3.4.2,3-二氨基萘浓度，0,1%.
以100cm3质量浓度0,1mol/dm3盐酸稀0,100g2,3-二氨基萘。清洗所得溶液。将100cm3溶液加入分液漏斗，加入15cm3正己烷，萃取化合物，1-2分钟，液体分层后，用白色标签过滤器过滤二氨基萘溶液，分离正己烷。溶液应存于深色容器，在2-3天内使用。
2.3.5.硒校准液的准备
硒离子溶液浓度，100μg/cm3.
.
将5cm3浓度1mg/см3标准硒溶液加入50сm3烧瓶中，用0.1mol/dm3稀释至满度。摇匀，一年内有效
硒离子溶液浓度，1μg/cm3.
将1cm3浓度100μg/cm3硒溶液加入100сm3烧瓶，用0.1mol/dm3稀释至满度。摇匀，分析时准备。
硒离子溶液浓度，0.1μg/cm3.
将5cm3浓度1μg/cm3硒溶液加入50сm3烧瓶中，用0.1mol/dm3稀释至满度。摇匀，分析时准备。
3.测量方法
该方法建立于样品消解，有机和无机形态的硒还原成亚硒酸盐，以4,5-benzopyazoselenol为酸中介，亚希酸盐和正己烷萃取的2,3-二氨基萘反应。
以“HIGHSKY-02”检测产生的荧光。
4.测量条件
测试中应满足以下条件
•大气温度20?5oC
•大气压强84,0–106,7kPa
•空气湿度低于80%,25oC
•电源187–242V,50?1Hz
5.测试准备
测量前应做好以下准备，样品和校准溶液的选择和保存。
5.1.样品的选择和保存
食品样品的选取处理应符合给定的产品规范。样品应装入密封袋中，保存在适当的情况下。谷物，鱼，肉应在不高于60℃的情况下晾干，在进样前应均质。
5.2.仪器运行准备
根据操作手册（OM）进行HIGHSKY-02运行的准备.
输入待测组分到物质清单后，选择“Methodselection”下菜单建立“Luminescence”测量方法（如果另一个方法预先设置好）.
“HIGHSKY-02-2M”参数更改，进入“Parameters”菜单,用“?”和“?”键控制，须设置。Sensitivity-minimum
Corr.ref.-enabled
Corr.trans.-enabled
在下列参考方法中仪器的参数已全部自动设置好。
5.3.“HIGHSKY-02”分析仪校准溶液的准备
加浓度0.00.05cm3，0.1?g/cm3校准溶液入100-150cm3烧杯中，于0.000.5?g硒相符。每个烧杯加入10cm3蒸馏水，5cm3浓硝酸，3cm3氯酸，蒸发至白蒸汽开始形成（大约3cm3）。烧杯壁用蒸馏水清洗，再蒸发。重复以上步骤直至溶液中无硝酸，建立硒浓度对仪器读数的校准曲线。曲线应是线性的。
加1cm3浓盐酸，沸水加热10分钟。加20cm3蒸馏水清洗烧杯壁。冷却溶液。按照3.4.2加入10滴氨水，2.0cm3乙二胺四乙酸，2%浓度，，放置5分钟，然后加入2.0cm3，1mg/cm3二氨基萘新溶液。搅匀，水浴加热5分钟。冷却后，移入加入100cm3分液漏斗中，加入5cm3正己烷。
1分钟内完成萃取，溶液相分离。移除水相，有机相通过“白色标签”过滤至带密封盖的烧杯，测量溶液。
5.4.校准曲线的建立以及校准稳定性的控制
进入“Calibration”菜单，设置“C0”–“C6”和“J0”–“J6”，设置“J0”后依次设置其他所有标准溶液的J值。
建立荧光强度（J0为给定溶液的强度）对铍含量，?g的校准曲线。应线性相关。
由于方法的同化作用，每天应建立校准曲线。
在方法的完全同化和获得稳定数据之后，进行简单的仪器校准。准备硒校准溶液l0，0,5?g.根据不含硒的溶液获得“J0”值,浓度为0,5?g的，获得“J1”值，（“C1”=0,5）。.同时可准备一或两个硒溶液0,02–0,4?g，进行“Measurements”。
如果预设值和测定值之间偏差不超过10%，浓度为0,1–0,4?g和20%，浓度为（0.02–0.1?g），校准曲线设定可用.
测量过程中滤光片No7用于激发通道，No21用于荧光通道。
荧光物质萃取液正己烷5cm3.
6.测量
测量硒离子浓度时应做好以下准备，样品消解，萃取及荧光测量。同时要求分析同种样品，
将0.100g均匀样品加入PITE容器，进行样品消解，加入5cm3浓硝酸。10分钟后，将容器放入萃取器中，关上萃取器的盖，消解室的盖，消解在以下情况下进行，8个大气压，20分钟。在消解完成5-10秒前按ESC，终止消解。当萃取器中的压力降至2.5-3个大气压时，按下ESC，打开压力阀降压。
可设置成以下参数，8个大气压，消解25分钟，在消解20分钟后切换至系统变换至“Pause”。对于饲料压力应置于8个大气压，消解10分钟。应根据样品类型进行设置。
6.1.1食品分析
食品分析6.1.1食品分析
在萃取器压力降到大气压后，容器应取出系统，冷却一段时间，溶液转入100-150cm3烧杯。用加入消化溶液的蒸馏水清洗容器，按6.1.3处理。如果硒样品浓度高（超过5mg/kg），则消化样品放入25cm3烧瓶。容器清洗后加入样品，蒸馏水加至25cm3。据6.1.3，取出5cm3进行分析。
6.1.2饲料分析.
萃取器中的压力降至0大气压时，容器应带出系统，冷却一段时间之后，溶液应用蓝色标签的滤纸过滤至25cm3烧杯。容器和过滤器应以蒸馏水清洗，加蒸馏水至满度，如果样品中硒离子浓度高（5mg/kg），取1-5cm3消化样品用于分析（如果硒离子浓度为5-25mg/kg，5cm3用于分析，如果更高，取cm3消化样品分析）。如果硒浓度低于5mg/kg则不需要用蒸馏水稀释。
注：允许用其他的微波消解系统或其他消解方式，如果其避免了小节中硒离子的损失（检验重复性和准确性）。
6.1.3消化样品的处理
消化样品放入烧杯，加入3cm3氯酸，蒸发至氯酸白色蒸汽不在出现（大约3cm3）。据5.3进一步处理，校准样品和校准溶液进行稳定性的控制
6.1.4荧光测量
Thefluorescenceoftheextractsismadein“Measurement”mode;inthiscasetheresultdisplayedontheinstrument’sscreenistheconcentrationofseleniuminthesampleinmicrograms.
提取物的荧光在“Measurement”完成，硒离子的浓度结果将显示于仪器屏幕上。
7.结果处理
7.1.样品中硒浓度（X,?g/dm3）根据公式计算:
（1）
其中:m–样品重量
Cmeas–,mg;测量浓度
Q–稀释系数，等价于烧瓶体积和消化样品的整数比。如果样品未稀释，Q=1。
两个测量值的平均数是为最终结果，偏差不要超过30%。。
实验室中测量应进行质量控制。
•分析重复性和准确度控制的日常评估
•重复性和准确度的相对偏差，测量结果稳定性的控制
根据实验进行质量控制
7.2.:根据下公式计算同种或同一样品的基本结果和控制结果之间的偏差
（2）
其中:c1–测量最大值
c2–测量最小值
结果应在下表范围内
测量范围,mg/kg重复性阈值,%
0.1to2.0incl.31
2.0to100incl20
