标题气相色谱法同时测定止痒搽剂中三组分的含量

　摘要：目的建立一种用气相色谱法同时测定止痒搽剂中樟脑、薄荷脑、冰片三组分含量的方法。方法采用聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布浓度为10%）；柱温155℃；进样口温度为190℃；FID检测器，检测器温度250℃。结果樟脑在0.198～1.191mg/ml范围内呈良好线性关系（r=0.99999），薄荷脑在0.132～0.790mg/ml范围内呈良好线性关系（r=0.99999），冰片在0.139～0.833mg/ml范围内呈良好线性关系（r=0.9999）；平均加样回收率分别为：樟脑95.21%，RSD为1.58%（n=9），薄荷脑102.71%，RSD为1.29%（n=9），冰片99.33%，RSD为1.40%（n=9）。结论该法简便快速，结果准确，可以有效地控制该药品的质量。
　　
　　关键词：气相色谱法；止痒搽剂；樟脑；薄荷脑；冰片
　　
　　SimultaneousDeterminationofThreeComponentsinAntipruriticLinimentbyGC
　　
　　Abstract:ObjectiveToestabilshamethodforsimultaneousdeterminationofcamphor,menthol,andborneolinantipruriticlinimentbyGC.MethodsUsing10%PEG-20Mpackedcolumn.Thecolumntemperaturewasat155℃.Injectortemperaturewasat190℃.FIDdetectorwithtemperatureat250℃.ResultsCamphorshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.198～1.191mg/ml（r=0.99999），mentholshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.132～0.790mg/ml（r=0.99999），borneolshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.139～0.833mg/ml（r=0.9999）；theaveragerecoveryandtherelativestandarddeviation：Camphor95.21%,RSD1.58%（n=9），Menthol102.71%,RSD1.29%（n=9）,Borneol99.33%，RSD1.40%（n=9）.ConclusionThemethodisconvenient,rapidandaccurate,andcanbeusedforthequalitycontrolofthedrug.
　　
　　Keywords:GC；AntipruriticLiniment；Camphor；Menthol；Borneol
　　
　　痱子属皮肤湿疹，为夏季常见皮肤病之一，尽管有其自限性，但发作时瘙痒难耐，皮肤渗透性差，影响患者的学习、工作和休息。针对痱子的生理特点，我们研制了止痒搽剂。临床应用证明，止痒搽剂质量稳定，疗效可靠，极大地减轻了患者的痛苦。在制定质量标准时，我们查阅了有关文献［1~4］，并根据制剂特点及实验室条件，建立了一种用气相色谱法同时测定止痒搽剂中樟脑、薄荷脑、冰片三组分含量的方法。该法简便快速，结果准确，可以有效地控制该药品的质量。
　　
　　1仪器与试药
　　
　　Agilent6820气相色谱仪及色谱工作站；瑞士METTLERAE-240（0.01mg）电子天平；樟脑对照品（批号110747-200107，供含量测定用,中国药品生物制品检定所）；薄荷脑对照品（批号110728-200506，供含量测定用,中国药品生物制品检定所）；冰片对照品（批号110742-200516，供含量测定用,中国药品生物制品检定所）；萘（批号111673-200401，GC内标物，中国药品生物制品检定所）；止痒搽剂（批号060425，060427，060429，铜陵市人民医院制剂中心）；无水乙醇为分析纯。
　　
　　2方法与结果
　　
　　2.1色谱条件色谱柱聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布浓度为10%）；柱温155℃；进样口温度190℃；FID检测器，检测器温度250℃；进样量2μl。在上述色谱条件下，樟脑、薄荷脑、龙脑、异龙脑与内标物峰之间的分离度均大于1.5，理论板数按樟脑峰计算大于2500，满足试验要求（见图1a）。
　　
　　2.2溶液的制备及线性关系的考察
　　
　　2.2.1内标溶液的制备精密称取萘适量，加无水乙醇溶解，并稀释制成每毫升中约含4mg的溶液，摇匀，即得内标溶液。
　　
　　2.2.2对照品溶液的制备精密称取适量樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品于同一棕色量瓶中，加无水乙醇溶解，并稀释制成每毫升中约含樟脑2mg，薄荷脑1.3mg，冰片1.3mg的溶液，即得对照品混合贮备液。
　　
　　2.2.3供试品溶液的制备精取样品2ml，置25ml棕色量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，得样品备用液；精密吸取样品备用液1ml于10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
　　
　　2.2.4空白实验按处方组成比例，取除三组分外的其它成分制成空白样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。在上述色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各2μl，注入气相色谱仪测定，记录色谱图，在与三组分峰保留时间相同处，无色谱峰出现。表明其它组分对三组分的测定无干扰，符合测定要求（见图1c）。
　　
　　图1GC色谱图（略）
　　
　　2.2.5标准曲线的制备精密吸取对照品贮备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml，分别置10ml棕色量瓶中，加内标溶液1ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照上述色谱条件测定，记录色谱图，分别以各自对照品峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，进样量（μg）为横坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为：樟脑A=-0.0016C 0.9736，r=0.99999，线性范围为0.198～1.191mg/ml；薄荷脑A=0.00335C 0.9692，r=0.99999，线性范围为0.132～0.790mg/ml；冰片A=0.00346C 0.9541，r=0.9999，线性范围为0.139～0.833mg/ml。
　　
　　2.3精密度实验精密吸取标准曲线制备项下的同一份对照品溶液重复进样5次，以3组分对照品峰面积与内标物峰面积的比值计算，RSD分别为：樟脑1.21%，薄荷脑1.26%，冰片0.97%。
　　
　　2.4重复性实验取同批样品5份，按供试品溶液制备方法处理，在上述色谱条件下测定，结果平均含量分别为：樟脑47.29mg/ml，RSD为1.13%（n=5）；薄荷脑45.86mg/ml，RSD为1.61%（n=5）；冰片16.77mg/ml，RSD为0.92%（n=5）。
　　
　　2.5稳定性实验取制备好的供试品溶液，按上述色谱条件，每间隔2h测定1次，RSD为1.37%（n＝6），结果表明样品溶液在12h内比较稳定。
　　
　　2.6加样回收率实验取已知标示量的样品适量于10ml棕色量瓶中，分别加入相当于样品量的80%，100%，120%的樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品溶液及1ml内标液，按供试品溶液制备方法处理，在上述色谱条件下测定，记录各自的峰面积并计算。平均回收率分别为：樟脑95.21%，RSD为1.58%（n=9）；薄荷脑102.71%，RSD为1.29%（n=9）；冰片99.33%，RSD为1.40%（n=9）。结果见表1。
　　
　　2.7样品的含量测定取不同批号的3批样品（060425，060427，060429），在上述测定条件下测定，按内标法以峰面积计算样品中樟脑、薄荷脑、冰片的含量。结果见表2。
　　
　　表1回收率实验（略）
　　
　　表2样品中樟脑、薄荷脑、冰片含量测定结果（略）
　　
　　3讨论
　　
　　3.1止痒搽剂为有一定乙醇含量的醇制剂，在本文所建立的测定方法下，样品无须任何处理，直接用无水乙醇稀释至一定浓度即可。与文献方法［5~7］相比，此方法更简便快速，且分离度好，回收率高，可作为止痒搽剂及相关制剂的质量控制方法。
　　
　　3.2由于止痒搽剂中有成分易受空气及紫外线的氧化而颜色变深，所以实验操作时应使用棕色瓶，并注意避光操作，以免影响含量测定结果的准确度。
　　
　　3.3内标物筛选中，曾对水杨酸甲酯、联苯、正十四烷、萘等进行试验，结果以萘为内标较为理想，且阴性对照无干扰。
　　
　　3.4在所建立的色谱条件下，冰片中的龙脑和异龙脑成分能完全分离，冰片的含量以龙脑和异龙脑峰面积之和计算。