标题单克隆抗体制备1：动物的选择与免疫

目前进行杂交瘤技术的研究多选用纯种BALA/C小鼠。纯种BALB/C小鼠较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。
　　
选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功，获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立的免疫方案开始初次免疫，免疫方案应根据抗原的特性进行设定。用于免疫的抗原大致可分为两类：可溶性抗原和颗粒抗原。
可溶性抗原免疫原性较弱，一般要加佐剂，半抗原应先制备免疫原，再加佐剂。常用佐剂有福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂。初次免疫时，将1～50μg抗原加福氏完全佐剂进行皮下多点注射或脾内注射（一般0.8～1ml,0.2ml/点）。3周后进行第二次免疫，抗原的剂量同初次免疫，加入福氏不完全佐剂进行皮下或腹腔内注射，腹腔内注射剂量不宜超过0.5ml。3周后进行第三次免疫，剂量同初次免疫，不加佐剂，腹腔内注射后5～7天即可采血测其效价。过2～3周后需进行加强免疫，剂量以50～500μg为宜，采取腹腔内注射或静脉内注射。3天后即可取脾融合。
　　
目前，用于可溶性抗原（特别是一些弱抗原）的免疫方案也不断有所更新，如：可将可溶性抗原颗粒化或固相化，一方面增强了抗原的免疫原性，另一方面可降低抗原的使用量。或者改变抗原注入的途径，基础免疫可直接采用脾内注射。同时使用细胞因子作为佐剂，也可提高机体的免疫应答水平，增强免疫细胞对抗原的反应性。
　　
与可溶性抗原相比，颗粒抗原免疫性强，不加佐剂就可获得很好的免疫效果。