标题HPLC法测定复方敏立通片中各组分的含量

摘要

　　采用反相HPLC法，以醋酸氟氢松为内标，在氰基柱上以水—甲醇—乙腈—三乙胺（80∶20∶20∶1.4，用磷酸调整pH为7.5）为流动相，检测波长为254nm，同时测定复方敏立通片中马来酸氯苯那敏和倍他米松的含量。方法简便，快速准确，各组分与内标有良好线性关系和分离度。平均回收率马来酸氯苯那敏为99.2％（RSD＝0.7％），倍他米松为100.9％（RSD＝0.6％），n=7。关键词：HPLC法马来酸氯苯那敏倍他米松醋酸氟氢松复方敏立通片复方敏立通片由马来酸氯苯那敏（2mg）和倍他米松（0.25mg）组成，具有消炎、抗过敏等药理作用。香港麒麟药厂生产，其含量测定方法尚未见公开报道。本文探索用HPLC法进行分离测定，在氰基柱上以醋酸氟氢松为内标，考察了样品中各组分的线性关系，并进行了回收率试验及样品含量测定，结果表明，本法简便迅速，结果准确。

　　1、仪器与试药

　　1.1 仪器Waters510输液泵，Waters490紫外检测器，Rheodyne7125定量进样阀，Waters740色谱数据处理机。

　　1.2 样品与试剂对照品倍他米松、马来酸氯苯那敏符合中国药典1995年版的规定，在本文色谱条件下无杂质峰出现，赋形剂和样品由香港麒麟药厂提供，醋酸氟氢松为化学原料，含量为99.9％，乙腈（色谱纯），甲醇、三乙胺和磷酸均为分析纯，水为重蒸水。

　　2、色谱条件与色谱参数

　　2.1 色谱条件色谱柱：SpherisorbCN（10μm，4.6mm×250mm），大连化物所；流动相：水—甲醇—乙腈—三乙胺（80∶20∶20∶1.4，用磷酸调整pH为7.5）；流速：1.5mL/min；检测波长：254nm；灵敏度：0.5AUFS；柱温：30℃；进样量：20μL。

　　3、方法与结果

　　3.1 内标溶液的制备称取醋酸氟氢松适量，加甲醇溶解并制成1g/L的溶液，备用。

　　3.2 线性关系精密称取马来酸氯苯那敏对照品400mg及倍他米松对照品50mg，置100mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。精密取上述溶液1、2、3、5、7、9、10mL，分别置100mL量瓶中，各精密加入内标溶液5mL，用流动相稀释至刻度，摇匀。照上述色谱条件进样20μL，以组分与内标物的峰面积之比为纵坐标，以各组分的浓度（mg/L）为横坐标，求出马来酸氯苯那敏及倍他米松的线性回归方程分别为：Y＝9.002×10-3X-7.6×10-3

　　r＝1.0000Y＝2.540×10-2X-2.3×10-3

　　r＝1.0000

　　结果表明，马来酸氯苯那敏浓度在40.2～402.0mg/L、倍他米松浓度在5.17～51.70mg/L范围内线性关系良好。

　 3.3 精密度试验在上述色谱条件下取样品溶液重复进样，测定样品峰面积与内标峰面积比值，计算各组分的RSD。马来酸氯苯那敏RSD＝0.8％（n=8）；倍他米松RSD＝0.6％（n=8），结果表明：本法精确度较好。

　　3.4 回收率实验精密称取马来酸氯苯那敏对照品约20mg，置100mL量瓶中，按处方加入各种辅料；另精密称取倍他米松对照品约25mg，置50mL量瓶中，加流动相超声处理使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密取此溶液5mL，加至上述100mL量瓶中，再精密加入内标溶液5mL，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过。取续滤液按上述色谱条件进样测定。结果马来酸氯苯那敏、倍他米松回收率分别为99.2％、100.9％，RSD分别为0.7％、0.6％，n=7。

　　3.5 样品测定精密称取本品的细粉适量（约10片量），置100mL量瓶中，加流动相超声处理使溶解，精密加入内标溶液5mL，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。取续滤液按上述色谱条件进样测定。

　　4、讨论

　　实验中曾比较了两种色谱填料对分离测定的影响，一种为岛津CLC—CN（10μm，5mm×150mm），另

　　一种为中科院大连化物所SpherisorbCN（10μm，4.6mm×250mm），前者的各组分容量因子明显大于后者，若使用岛津氰基柱需调整流动相中有机相的比例，流动相为水—甲醇—乙腈—三乙胺（56∶24∶20∶0.4，pH=7.5）。本文实验中采用的三元流动相，也比较过用各种比例的水—甲醇或水—乙腈为流动相，但对于本文所含组分分离效果始终不理想，主要是氯苯那敏的容量因子没有合适的值。