标题高效液相色谱测定复方胃肠佳胶囊中丹皮酚的含量

【摘要】 　　目的建立复方胃肠佳胶囊中丹皮酚的含量测定方法。方法运用超声提取方法对复方胃肠佳胶囊进行提取，并用高效液相色谱法进行丹皮酚的含量测定。结果丹皮酚在0.1～0.5 μg之间与峰面积呈良好的线性关系，r=0.999 9，平均加样回收率100.14％ ，RSD为0.95％（n=5）。结论高效液相色谱法测定丹皮酚，方法灵敏，重复性好。

【关键词】 复方胃肠佳胶囊 丹皮酚 超声提取法 高效液相色谱法

　　 复方胃肠佳胶囊由徐长卿、五香血藤、吴茱萸、九月生等药材组成，贵州省黔东南苗族地区民间常用于治疗胃病，并且应用较广泛，具有祛风活血、理气止痛之功效，临床上可用于治疗浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃痛、胃溃疡、十二指肠溃疡等。现代研究表明丹皮酚具有抗菌和消炎作用，为复方胃肠佳胶囊的有效成分之一。本实验以高效液相色谱法对复方胃肠佳胶囊所含的丹皮酚进行含量测定研究。

　　1 仪器与试剂

　　仪器：Agilent-1100高效液相色谱议（二元泵，DAD检测器）。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。丹皮酚对照品（批号：0708－9704）由中国药品生物制品检定所提供。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；DiamonsilTM （钻石）C18柱（250 mm×4.6 mm，迪马公司生产）,流动相为甲醇－水（60∶40），检测波长为274 nm［1］。

　　2.2 对照品溶液的制备

　　精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每毫升含0.101 4 mg的溶液作为对照溶液，即得。

　　2.3 供试品溶液的制备

　　取样品0.2g，精密称定重量，加甲醇10 ml，精密称定重量，超声提取20 min，放冷，再称定重量。用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得［2］。

　　2.4 阴性样品溶液的制备

　　取阴性样品（缺徐长卿）0.2 g，按供试品溶液的制备方法制备，即得。

　　分别吸取10 μl的对照品、样品与阴性样品溶液注入液相色谱仪测定。结果表明，在与丹皮酚对照品相应位置上无干扰峰出现，说明处方中其它药味对测定结果无影响。见图1。

　　2.5 线性关系的考察

　　精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每毫升含1.014 mg的对照溶液。再精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5 ml分别置于10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，分别精密量取上述对照品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为A=5 314.49C -9.590 4，r=0.999 9。结果表明，在色谱条件下，丹皮酚在0.1～0.5 μg之间与峰面积呈良好的线性关系。

　　2.6 精密度实验

　　精密吸取对照品溶液2 μl，注入液相色谱仪重复测定5次，RSD值为0.50%，说明仪器的精确度良好。

　　2.7 稳定性实验

　　精密吸取供试品10 μl，注入液相色谱仪，进行稳定性考察，在每间隔2 h测定1次，共测定5次，测定数据稳定，5次的RSD值为0.24%，表明在10 h内样品稳定。

　　2.8 重复性实验

　　取供试样品（批号：020402）按含量测定方法进行5次测定，测得丹皮酚百分含量平均值为0.688 mg·ml-1，RSD值为1.79%，说明本方法重复性良好。

　　2.9 回收率实验

　　取已知含量的胃肠佳（批号：020402）5份，每份约0.15 g，精密称定，分别精密量取丹皮酚对照品溶液（0.1014 mg·ml-1）1 ml，按制备供试品溶液方法制备，并按含量测定方法进行测定，计算回收率。结果平均回收率为100.14%，RSD值为0.95%。结果见表1。表1 回收率实验结果（略）

　　2.10 样品含量测定

　　按正文含量测定项方法测定本品10批样品，并分别平行操作一份。结果见表2。表2 10批样品中丹皮酚含量测定结果（略）

　　根据表2中10个批号样品测定结果，本品每克含徐长卿以丹皮酚（C9H10O3）计,不得少于0.5 mg。

　　3 讨论

　　曾先后考察了以下提取方法：①40%甲醇；②50%甲醇； ③60%甲醇； ④80%甲醇；⑤甲醇。分别超声10，20，30 min。结果表明，甲醇超声20 min测得的样品含量最高，故选择甲醇超声20 min的提取方法［3］。

　　用HPLC法测定复方胃肠佳胶囊中丹皮酚的含量，经方法学研究表明此方法具有样品预处理简单，回收率好，重复性好，专属性强等优点，作为复方胃肠佳胶囊质量标准检测方法，能够更有效地控制该制剂的质量。
文章链接：中国化工仪器网 http://www.chem17.com/news/detail/27864.html