口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus)引起的一种偶蹄动物共患的急性、热性、高度接触性传染病,主要侵害猪、牛、羊等偶蹄类动物。该病传播速度快、宿主范围广、发病率高,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病之首。FMDV有七种血清型、七十多种亚型,变异性强,给病毒的防治造成很大困难。它可导致国家的畜产品进出口贸易受限,造成巨大的经济损失和政治影响。因此,建立准确、快捷的区分感染活病毒(发病或注射弱毒疫苗)和注射灭活疫苗动物的诊断方法,在检测和防止FMD的发生、活畜检疫等方面都是十分迫切需要的。
FMDV感染动物既能产生结构蛋白(SP)抗体也能产生非结构蛋白(NSP)抗体,而现行灭活疫苗在生产过程中大多数去除了非结构蛋白,因此,动物在接种FMDV灭活疫苗后,主要产生结构蛋白抗体,很少或者不产生NSP抗体。所以,以NSP为抗原,检测动物体内NSP抗体是一种很好的区分自然感染动物和疫苗免疫动物的诊断方法(NSP口蹄疫3ABC检测试剂盒主要用于检测自然感染的动物)
【原 理】
本品系由包被猪口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因工程表达产物包被微孔板和酶标记抗猪IgG及其他试剂组成,应用酶免间接法原理(ELISA)检测猪血清或血浆中猪口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC IgG抗体。实验时,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有猪口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入终止液反应后,用酶标仪450nm波长测定各反应孔中的OD值
【使用意义】
口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病。在猪的预防免疫工作中,最值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。在过高的抗体水平进行免疫,过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败;在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁猪的健康。
该试剂盒检测猪血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC的抗体。用于区别口蹄疫野毒感染猪和用灭活疫苗免疫猪。
【试剂盒组成】
1. | 猪口蹄疫3ABC抗原包被微孔板条 | 96T×2 |
2. | 酶标记物 | 22ml×1 |
3. | 样品稀释液 | 50ml×1 |
4. | 洗涤液(用前1:20稀释) | 40 ml×1 |
5. | 显色剂A | 7 ml×2 |
6. | 显色剂B | 7 ml×2 |
7. | 终止液 | 7 ml×2 |
8. | 猪口蹄疫3ABC 抗体阳性对照血清(已灭活) | 1 ml×1 |
9. | 猪口蹄疫3ABC 抗体阴性对照血清(已灭活) | 1 ml×1 |
10. | 说明书 | 1份 |
【规格】192头份/盒
【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
【结果判定】
1. 阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.15;
2. 阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.5;
3. 结果判定:样品A450值大于0.38,判为阳性;样品A450值在0.2到0.38之间,判为可疑;样品A450值小于0.2,判为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC的抗体。