标题结肠秆菌感觉态细胞的制备

 
感觉态的细胞可以摄入外部溶液中的DNA，而常态的细胞却不可以，所以要转化质粒DNA进入了结肠杆菌务必首先制备感觉态的结肠杆菌细胞。

1、取0.1ml过夜培育物转种于含10ml LB营养物质的三角学瓶中，37℃干燥箱培育3h至OD600=0.3
2、而后再在4℃下以4000rpm离心10min，去上清液
3、在4℃下以4000rpm离心5min，去上清液真空干燥箱
4、而后把培育物倒入1.5ml离心管中，冰浴10min。
5、把菌体悬浮于15m1寒冷的0.1M CaCl2溶液中，置冰上30min
6、取1百分之百结肠杆菌E.coli接种于含2ml LB营养物质的玻璃管中，37℃电热恒温鼓风干燥箱培育过夜
7、将菌体悬浮于0.1ml CaCl2溶液中，冰浴安放4-12hr备用。