标题麦子总RNA的提出取得

 
 
从黄化麦子苗中提出取得总RNA，可以为cDNA文库的构建做好准备。我们重点是要保障RNA的完整性、产率、避免修饰和纯净度，特别是完整性、避免修饰和纯净度。RNA是单链，2’OH是它的化学性质远比DNA活泼。所以，提出取得RNA颇为不易。加之RNA的不均一性，要将全部的RNA（rRNA、tRNA、mRNA）绝对提出，更加有挑战性。
而Rnase是无处不在的（这种酶遇高温后也不会失去活性，复性容易，在胞里外都有散布，不需拿获，不必二价金属离子的合适）；RNA还最怕DNA污染，由于若做RT-PCR，DNA的存在会降产量低物的纯净度和速率全部以上的因素都构成了我们成功提出取得RNA的绊脚石。不过我们可以无须思索问题RNA的机械剪切，由于RNA一般较小，普通不会遭受机械剪切的影响。