本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗磺胺二甲基嘧啶抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,磺胺二甲基嘧啶抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的磺胺二甲基嘧啶竞争性地与磺胺二甲基嘧啶抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;加入反应终止液,在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的磺胺二甲基嘧啶浓度与吸收光强度成反比。
磺胺噻唑处理,任何样本时,都须注意: (1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。(2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果。 样本处理步骤:(A)组 织(鸡、鸭、猪肌肉/肝脏、鸡蛋、鱼、虾等) 取组织样本用匀浆机10000r/min匀浆1 min。 2. 称取3±0.05g匀浆物置离心管中,先加入3ml 0.02M PB充分振荡混匀,再加入4ml乙酸乙酯和2ml乙腈,充分振荡5min,于15℃,4000r/min以上速度离心10min; 3. 移取2ml上层液体(约相当于1g的样本)在50-60℃氮气或空气吹干; 4. 加入1ml正己烷溶解干燥的残留物,再加入1ml稀释后的复溶液强烈振荡混合30s,室温4000r/min,离心5min,除去上层液; 5. 取20µl下层用于分析。
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