标题5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒实验时应注意的事项

标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性 HRP，也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在 ELISA 中可使本底加深。冻结标本融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。

反复冻融会使蛋白效价降低，所以待测标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。也可加入适当防腐剂。每个标本量收集体积＝ 100ul × 检测种类，如要做复孔，标本量收集体积＝ 100ul × 检测种类×2 。
对于作某一个具体指标来说，最好先用一系列稀释度作一批标本测定，得出对实验有意义的一个稀释度（即测定剂量反应曲线），然后用一个最适稀释度测定即可。

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃ 备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时， -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度
可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

血清标本采集时，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以 HRP 为标记的 ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。