标题土壤DNA快速提取试剂盒的使用方法

 

　　MP土壤DNA快速提取试剂盒，可在30分钟之内，快速、有效地从土壤以及其他环境样品中提取基因组DNA。适用于从土壤中的所有生物包括G+细菌、酵母菌、真菌、藻类、线虫类甚至真细菌的孢子、芽孢中提取基因组DNA。而且它还可以提取其他环境样品的DNA，如沉积物、排泄物、废水、雪水等。只需500mg的样品即可得到足够的DNA。实验原理为用特殊的裂解介质E处理样品，之后使用自旋过滤器基于硅吸附DNA原理的GENECLEAN®步骤进行纯化，得到的DNA可用于PCR、限制性酶切、电泳及其他下游实验。

　　很多用户对于我们代理的MP土壤DNA快速提取试剂盒的提取方法不是很清楚，特别是对于没有FastPrep®仪器的情况下，更是感到无从下手。为了解决用户的烦恼，特整理了Fast DNA® SPIN Kit for Soil土壤DNA快速提取试剂盒的提取方法，分享给大家，只需按照步骤操作，即使没有FastPrep®仪器的情况下，也可以快速提取土壤DNA！

　　1、称取0.3 g~0.4 g样品加入Lysing Matrix E Tube 中。（注意：需保证加完样品及所需溶液后，管中应留出不少于200 μL 空间）  
2、加入978 μL SPB，加入122 μL MT Buffer。  
3、盖紧Lysing Matrix E Tube的盖子，将离心管置于涡旋混合仪上，对管内物质进行震荡破碎均质化，时间设定为40 s~50 s。（注意：时间不可过长，有可能打断基因组DN段降低提取质量）从各个角度都可以震荡一下，不要光是底部。  
4、在8000 r/min转速下离心15 min，有利于去除体积较大或具有复杂细胞壁结构的样品碎屑。  
5、将上清液用大口枪头吸出转入1.5 mL的微离心管中，加入250 μL PPS，手持离心管晃动10次以混匀。  
6、在8000 r/min下离心5 min，用大口枪头将上清液转移至5 mL离心管中。  
7、摇匀Binding Matrix后，吸取1.0 mL加入上一步离心管中。  
8、将离心管上下颠倒2 min后，静置3 min，使DNA附着于Bingding Matrix上，并等待二氧化硅基质沉淀。（这一步根据沉淀情况时间可以适当延长） 
10、将剩余的上清液与沉淀物重新混匀，吸取约600 μL混合液移入SPIN Filter中，8000 r/min下离心1 min。  
11、倒掉收集管中的液体，重复上一步操作直至5 mL离心管中的液体吸尽。 
12、加入已制备好的SEWS-M溶液500 μL，用小枪头小心混匀后，8000 r/min下离心1 min后，弃去收集管中的液体。  
13、为更好的去除杂离子，重复第12步，更换为1.5 mL离心管。
14、在8000 r/min下离心2 min，去除残留的SEWS-M溶液，然后更换为干净的1.5 mL离心管。（若发现残余溶液较多，可重复此步骤）
15、在室温下，将SPIN Filter风干5 min。（时间可以更久一些） 
16、往SPIN Filter加入80 μL DES溶液，用小枪头小心使之与Binding Matrix 混匀，65℃水浴15 min（有利于DNA的溶出）。8000 r/min下离心2 min，可得到约50 μL的DNA溶液。再加入80 μL DES溶液重复第16步操作，一共可得到约100 μL的DNA溶液。
17、弃去SPIN Filter，将提取好的DNA存于-20℃冰箱保存。

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