分子量分级范围:A.肽及球形蛋白质:~700;B. 葡聚糖(线性分子):~700
葡聚糖凝胶G-10化学和物理性质:
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。 葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。
葡聚糖凝胶G-10化学稳定性:
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
葡聚糖凝胶G-10物理稳定性:
葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。参考资料:
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葡聚糖凝胶G-10分离技巧:
1.分离时流速不可太快,切切不可心急,所谓欲速则不达;接馏分时可开全速,节省时间。
2.柱子尽可能长,葡聚糖凝胶柱长的增加将极大地改善分离,所不要吝惜填料,宁可将填料全装在一根大柱子中,不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力,打击敌人。
3.馏分一定要接的细,可1/10,或1/20 个保留体积接成一馏分。
4.洗脱体积一般为2-3个保留体积,对特殊保留强的化合物,可洗脱5个保留体积。
5.鞣质成分死吸附严重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣质
7.填料反复使用,每次用完,一般可用甲醇将柱子洗干净,然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来,待用。暂时不用试可以水洗→含水醇洗(醇的浓度逐步递增)→醇洗,最后泡在醇中贮于磨口瓶中备用。如长期不用时,可在以上处理基础上,减压抽干,再用少量乙迷洗净抽干,室温充分挥散至无醚味后,60~80°C干燥后保存。
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