标题细胞培养问题及解决方案

1、细胞传代时间比以前细胞正常传代时间长，比如以前传代需要一天现在传代需要1.5天或者2天；

2、细胞在传代过程中细胞形态产生变化，比如以前细胞正常形状是圆形的现在是梭形或者细胞变瘦；

3、细胞溶液中有小黑点。

上述原因出现有下面两组主要原因构成：A 支原体污染   B血清营养不够

A、支原体污染 判断方案

同一个培养箱中的培养瓶里面的细胞  在显微镜下逐个观察如果有80%的细胞有小黑点可以判断是支原体污染；

50%一下的细胞有小黑点， 可以判断不是支原体污染而是血清营养不够引起的细胞有小黑点。

B、血清营养不够判断方案

除过上述支原体污染原因外，细胞溶液中出现小黑点的主要原因就是培养细胞的血清营养不够；

血清营养不够会引起细胞过渡性分泌或者细胞碎片脱落，这些脱落物是形成小黑点的主要原因。

不规范血（假血清、国内灌装血清）清对下游实验的影响：

因为国内自然环境影响（雾霾））加上牛吃的草中有农药残留，饲料中过度性的促进牛生长的添加剂，会引起牛血液中分泌对细胞生长可能有害的蛋白因子，从而引起科研者研究的目标蛋白在细胞的表达量或者趋势不对或者不表达；这个情况经常在WB实验中发生（研究的目标蛋白趋势不对或者不表达）；

综上所述建议客户购买有国家资质的原装进口血清，比如ZETA LIFE胎牛血清。

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