细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。 所以细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲,可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。细胞株的生物等级,由于有些细胞株及菌株属于管制品,所以从国外购货比较麻烦。购买国外细胞株时需要考虑哪些因素呢 ?
一、如果通过国外细胞株在国内的代理商购买的话,合同中需注明以下一些内容:
1、明确的到货时间,这个时间需注明的是工作日,还是普通日。
2、采用什么样的运输方法?
3、如果属于技术外的因素而细胞株无法培养活,供方需负什么样的责任?
4、细胞株的详细资料,以及细胞株的代数,其中,细胞株一般都在几十代,这个需要与国外确认
5、需在合同中注明原装进口,避免相关公司鱼龙浑杂,从国外购买回一株细胞株,经过培养传代后,同时供应给几个人;一般国外进口的细胞株都会有原装的冻存管,而且每一支冻存管上都会有批号,而且每次的批号都不一样。
6、在决定购买细胞株之前,必须仔细阅读他们的培养信息,所谓“细胞株未到,培养基先行一步”。
7、在接到细胞株后,zui好要求供应公司的人员现场参与,从而用于确认责任。
8、在培养前,请确认您的二氧化碳培养箱二氧化碳浓度的准确性,国外的细胞株建议用进口的细胞培养瓶,比如:nunc等品牌的培养瓶。
i.询问你的代理商或者经销商,接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO,因为有些细胞厂家建议不要离心,他们会认为离心而导致的碎片比DMSO产生毒性的害处更大,如果可以离心,转速不要过高,一般都在1000转以下,此处需要注意,因为有的公司会拿这一点来拒绝索赔!
9、培养基的服务,仔细与供应商确认培养基的品牌及份量,以免供应商以些理由来推翻你索赔的理由。选择hyclone等优质培养基品牌
k.在细胞株复苏时,一定要先想好步骤再做,一步一步来做,避免导致操作中的污染,复苏是一个非常重要的步骤,往往容易导致污染,然后为污染所导致的杂质而伤透脑筋。
二、在购买国外细胞株时,需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上,采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。
三、报关时尽量提供比较充足的证明材料,以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡,甚至于被退回给发货人。