标题BOD5测定仪水样的采集及预处理

水样采集按照《地表水和污水监测技术规范》（HJ/T 91-2002标准）的相关规定执行。

采集的水样应充满并密封于棕色玻璃瓶中，水样量不小于1000 mL，在0～4℃的暗处运输和保存，并于12 h内尽快分析。24 h内不能分析，可冷冻保存（冷冻保存时避免培养瓶破裂），冷冻水样分析前需解冻、均质化和接种。冷冻水样可能会造成测定值偏低的现象。

水样预处理

PH值

水样的PH 值若超出6.5～7.5 范围时，可将取来的水样，用滴管滴加盐酸或氢氧化钠溶液，加几滴，摇匀后，用玻璃棒沾一滴到精密PH滤纸上，根据颜色变化，在色板上找出其对应的PH值，反复几次，将水样PH调节至7.2左右。此步骤在测试前不可省略，否则，水样中细菌无法繁殖，水样不能降解，会造成BOD测量错误。

温度

在测定前将水样放置于恒温箱中，使其温度在20℃左右。以减少测量误差。

溶解氧

为保证水中溶解氧含量，应将水样降温或升温至20℃后，搅拌30分钟，以便使水样中溶解氧达到饱和。

稀释接种

稀释

如果超过仪器测定范围，可用稀释水稀释样品。所加入的稀释水也应保持为20℃，并曝气使氧达到饱和，如需要若干份相同的样品试验时，应稀释足够量的原水样，并从稀释样中取出与量程对应的体积。例如，当试验原水样稀释两倍时，稀释倍数为2；当原水样和接种稀释水比例是1∶9时，则稀释倍数为10。再根据（3.6）章节的计算方式得出水样的BOD值。

接种

BOD实验要求水样含有供生物氧化的有机物和适量的氧化有机物的需氧细菌，以及吞食有机物和增进需氧细菌生长的其他微生物。如果水样中根本没有或几乎没有这类微生物，就必须对水样按一定比例加入这类微生物溶液。这个过程应称之为接种。与生活污水不同，工业废水可能不含有足够量的细菌以供样品中所含有机物完全的生化分解，如果所测定的样品就是这种废水，应加入接种溶液。

用于接种的溶液为20℃放置24～36小时的未经处理新鲜生活污水的上清液。在下次实验中，若要使用以前测定过的水样作为接种液应经滤纸过滤，这种滤液在冷藏（约20℃）、避光的条件下保存，一般在1个月内可能是有效的。

每升水样加入5～10mL接种液（根据样品的情况和接种液菌种活性）。按步骤测定BOD，数日后获得的示数可以作为试验样品真实的BOD值。

注意：当使用上述方法接种时,不必校正接种的BOD读数。由于所加入接种液量相对水样量来说较小，不致于影响BOD的测定结果。如果上述方法未能引起水样中有机物的生物分解从而延迟微生物反应，会使测定值偏低，这时应增加所加入接种液的量。

增加后的接种量控制在2%～30%之间，通常取2％，5％，10％三种比例，按比例将接种液加入到水样中，例如添加10%的接种液方法：取900mL原水样，再加入100mL接种液，混合均匀。再根据量程取样量量取接种水样进行实验。此时由于接种液的增加会影响BOD示数，因此需将单纯的接种液与接种后水样分别同时进行测定。再根据（3.7）章节的计算方式得出水样的BOD值。

接种液的获得

（1）城市污水，一般采用新鲜的城市污水，在室温下放置一昼夜，取上清液使用。

（2）表层土壤浸出液，取花园土或植物生长土壤，加入1L水，混合并静置10分钟，取上清液使用。

（3）用含城市污水的河流或湖泊。

（4）污水处理厂的进水。

（5）用上次做BOD实验的废液，用滤纸过滤，静置后使用。

（6）购买BOD菌种，按说明书使用。

除氯

让样品稳定1～2小时，可以消除掉样品中的氯气，如果样品含有高浓度的氯气可加入配制好的亚硫酸钠溶液除去。其加入量的计算方法是：取中和好的水样100mL，加入1＋1 乙酸10mL、100mg/L碘化钾溶液1mL，混匀。以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠溶液滴定游离碘。根据亚硫酸钠溶液消耗的体积，计算水样中所需加亚硫酸钠溶液的量。例如100ml水样消耗0.5ml亚硫酸钠溶液，那么1L水样所需亚硫酸钠溶液的量为5ml。如果加入亚硫酸溶液的量过多而影响水样测定，可适当增加亚硫酸钠溶液的浓度，以减少加入溶液的体积。

抑制硝化作用

测定一般水样的BOD时，硝化作用很不明显或根本不发生。但对于生物处理池出水等废水，则含有大量硝化细菌，在测定过程中硝化细菌会消耗氧气，因此，在测定BOD时也额外增加了反应过程的需氧量。对于这种水样，如只需测定有机物的需氧量，应加入硝化抑制剂，如丙烯基硫脲（C4H2N2S）等。

含毒工业污水的处理

含有苯酚、甲醛、重金属盐等能够抑制微生物活动的工业废水，一般的接种液不能很快繁殖，应加入经生物驯化的菌种。驯化方法为：取一瓶生活污水，每天去掉10%上清液，补充有毒工业废水，7天到10天即可完成驯化。测定含毒工业污水时，可加入经驯化的菌种代替普通菌种。做完试验后，可将样品留作下次试验的菌种。