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标题小鼠胱氨酸(cystine)elisa试剂盒说明书

   

提供者:里苏(上海)生物技术有限公司    发布时间:2012/7/13   阅读次数:673次 >>进入该公司展台

                                          小鼠胱氨酸(cystine)elisa试剂盒说明书

公司是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一,代理许多国际先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。

小鼠elisa试剂盒使用目的:
  本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中胱氨酸(cystine)含量。
实验原理
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胱氨酸(cystine)水平。用纯化的小鼠胱氨酸(cystine)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胱氨酸(cystine),再与HRP标记的胱氨酸(cystine)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胱氨酸(cystine)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胱氨酸(cystine)浓度。
试剂盒组成
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠elisa试剂盒操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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