标题注意操作大鼠Elisa试剂盒事项与步骤

　　注意操作大鼠Elisa试剂盒事项与步骤

　　大鼠Elisa试剂盒注意事项:

　　1. 大鼠Elisa试剂盒冻结与寄存：-20℃取出后主张放入2～8℃冰箱中冻结约，每隔段时间悄悄摇晃均匀，不可直接放入温度较高处冻结，防止因温度改变太大，形成蛋白质凝聚而出现沉积，血清的质量下降。若短期无法用完瓶，主张无菌分装,再放回冷冻，防止反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白，形成絮状物质变差。

　　2. 大鼠Elisa试剂盒是否灭活：加热可灭活血清中补体系统，在少数情况下(培育ES细胞，滑润肌细胞时)主张灭活，在培育其余细胞时不主张灭活血清。血清灭活十分简单产生沉积，如必须灭活请按56℃，30 min，轻微摇晃准则操作，灭活温度高、时间长、摇晃不均都简单产生沉积。

　　3. 大鼠Elisa试剂盒培育基：无血清培育基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势，可是，血清仍然是培育液中根本的添加物，尤其是在原代培育或细胞成长状况不良时，常常会先使用有血清的培育液进行培育，待细胞成长旺盛后再换成无血清培育液。

　　大鼠Elisa试剂盒操作过程 ：

　　1.用盖片镊人Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭洁净，不要用纱布;

　　2.将盖玻片悄悄放入6孔培育板(每孔片)或培育皿中(每个平皿可放置2-3片);

　　3.在间隔紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

　　4.将通过计数的细胞悬浮液移入培育板中，使盖玻片彻底浸在培育液中;

　　5.将人Elisa试剂盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞成长至覆盖培育板底部2/3面积时，将培育板取出，用盖片镊悄悄取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

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