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标题推送:兔二肽基肽酶VI (DPP6) ELISA 试剂盒 @2023已更新推荐

   

提供者:上海笃玛生物科技有限公司    发布时间:2023/12/22   阅读次数:22次 >>进入该公司展台
                                       

兔二肽基肽酶VI (DPP6) ELISA 试剂盒


实验原理


        1. 抗原抗体反应
ELISA试剂盒中的抗原或抗体被固定在固相载体上,当加入待测样本时,样本中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体发生反应,形成抗原抗体复合物。
        2. 酶标记物的结合
将酶标记物与特异性抗体或抗原结合,形成酶标记抗体或抗原。酶标记物在反应中起到催化作用,加速反应进程,提高检测灵敏度。

3. 酶促反应
在酶标记物与抗原抗体复合物结合后,加入底物溶液,底物在酶的催化下发生氧化还原反应,产生颜色变化。颜色深浅与待测样本中的抗原或抗体浓度成正比。

4. 吸光度检测
将反应体系中的吸光度进行测量,通过比较标准品溶液与待测样本溶液的吸光度值,即可计算出待测样本中的抗原或抗体浓度。

 

 

实验所需自备物品

1. 酶标仪(450nm)

2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

 

试剂盒组成

名称

96 孔配置

48 孔配置

备注

微孔酶标板

12 孔×8 条

12 孔×4 条

标准品

0.5mL

0.5mL

按说明书进行稀释

标准品稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

样本稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

检测抗体-HRP

6mL

3mL

20×洗涤缓冲液

20mL

20mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

底物 B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2 张

2 张

说明书

1 份

1 份

自封袋

1 个

1 个


 操作步骤


1)涂层:微孔板的孔涂上捕获抗体或抗原。

2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛血清白蛋白或羧甲基纤维素),阻止非特异性蛋白质结合。

3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或抗体的样本。

4)洗涤:去除未结合的物质。

5)检测抗体添加:加入对特定抗原有特异性的酶标记检测抗体。

6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测抗体。

7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物产生颜色变化。

8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。

9)读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下),吸光度与样本中抗原或抗体的浓度成正比。

兔二肽基肽酶VI (DPP6) ELISA 试剂盒


结果分析

根据标准品和样本的OD值,绘制标准曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析方法可参考试剂盒说明书或相关文献。

注意事项


注意事项:

A 仔细阅读说明书。

B 检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期,请勿使用。

C 按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)。

D 标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。

E 准备好所有实验额外所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,酶标仪)。

F 按说明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量。

G 检查试剂盒内每种试剂的贮存条件,所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。

H 检查不稳定或者变质的试剂溶液(比如沉淀或变色)。有些试剂,比如标准品稀释液或者检测稀释液,可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之,必需充分混匀。而由于沉淀物的特性,在加入酶标板之,必需不停搅拌。

I 充分的孵育时间和温度。

J 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

K 在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。

L 在实验开始之,安排好实验流程。

M 在实验开始之,清洁工作台。

N 若有问题,应与我公司或代理商的技术支持联系

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