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抗耐药性基因1(BCAR1)ELISA试剂盒
实验原理ELISA运用了学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原--酶 (荧光基团) -底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。
ELISA试剂盒的操作步骤如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.结合一抗:用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检,每孔100μl,要设立阴性对照,37℃孵育1.5h。6.洗涤:同上。7.结合酶标二抗:每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀释倍数根据产品不同有所不同,可按说明书进行)50μl,37℃孵育1h.8.洗涤:同上。9.显色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室温避光显色10min。10.待显色后,每孔加入50μl终止液(2mol/L H2SO4)终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值,以确定水平。以上步骤仅供参考,具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。
酶免ELISA试剂盒是一种常用的学实验技术,常用于抗原或的定量检测。这种试剂盒利用酶联吸附法(ELISA)技术,将已知的抗原或吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。ELISA试剂盒具有高灵敏度、高特、快速、易操作等优点,在医学、生物学和化学等域广泛应用。
酶联吸附法(ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,常用于医学、生物域中的抗原或检测。其使用范围包括:1.临床诊断:ELISA可以用于检测传染病(如、等)、标志物等,协助进行诊断。2.食品安全:ELISA可以用于检测食品中的有害(如残留、兽药残留等),保障食品安全。3.监测:ELISA可以用于评估水质、空气等指标,监测状况。4.生物分子检测:ELISA可以用于检测生物分子,如蛋白质、多肽、等,在生物医学研究域广泛应用。总之,酶联吸附法在医学、生物域中具有广泛的应用价值,是临床诊断和中重要的辅助手段。
ELISA试剂盒用法
操作步骤
1. 工作:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟,使试剂盒恢复至室温。同时好实验所需的材料和。2. 加样:在酶标板的弟1个孔中加入品50μL,然后在后续的孔中依次加入待测样本50μL。3. 温育:将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。4. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内。5. 加酶:在每个孔中加入酶标物100μL。6. 温育:再次将酶标板密封,在37℃下温育30分钟。7. 洗涤:用洗涤液清洗酶标板,共洗涤5次。每次洗涤后,用吸水纸轻轻吸干孔内。8. 加底物:在每个孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 终止反应:在每个孔中加入终止液50μL。10. 检测:用酶标仪在450nm波长下读取各孔的吸光度(OD值)。
抗耐药性基因1(BCAR1)ELISA试剂盒
结果分析
根据品和样本的OD值,绘制曲线,从而计算出样本中角蛋白1(KRT1)的浓度。具体分析可参剂盒说明书或相关文献。
注意事项
1. 在操作中,应保持酶标板的干燥,避免水分进入孔内。2. 加样时需确保加样准确、无气泡产生。3. 温育和洗涤中需严格控制时间和温度,确保实验结果的准确性。4. 在使用酶标仪读取OD值时,需确保波长设置正确,避免误差产生。5. 在整个实验中,需保持操作的清洁和整洁,避免交叉污染。
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