兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA试剂盒 29

酶联吸附法（ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，常用于医学、生物域中的抗原或检测。其操作步骤如下：1.包被：将抗原或与酶结合，形成酶标抗原或，并固定在固相载体上。2.洗涤：去除未结合的和杂质。3.封闭：加入封闭液，封闭固相载体上未结合的位点，以非特结合。4.洗涤：去除未结合的封闭液和杂质。5.加样：加入待检测的样本，使其与固相载体上的抗原或结合。6.洗涤：去除未结合的样本和杂质。7.加入酶标：使固相载体上的抗原或与酶标结合，将抗原或间接标记上酶。8.洗涤：去除未结合的酶标和杂质。9.显色：加入底物，使酶催化底物生成有色产物，根据颜色反应的程度进行抗原或的定性或定量检测。需要注意的是，具体的操作步骤可能因实验设计、试剂品牌等不同而有所差异。在进行ELISA实验时，应严格按照试剂盒说明书和实验指导手册进行操作，控制好实验条件和操作步骤，以实验结果的准确性和可靠性。

试剂盒性能

1. 特高：由于是抗原的特结合，因此试验的特很高，能够排除其他的。

2. 灵敏度高：由于酶的放大作用，使得试验的灵敏度大大，能够检测出微量的抗原或。

3. 操作简便：ELISA试验操作相对简单，容易，适合于大规模样本检测。

4. 适用范围广：可以用于检测各种抗原、和等生物分子。

样品收集、处理及保存

1. ：使用不含热原和内的试管，操作中避免任何细胞，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将和红细胞迅速小心地分离。

2. ：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。

酶联吸附法（ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，常用于医学、生物域中的抗原或检测。其作用包括：1.诊断：ELISA可以用于检测或组织样本中的特定分子，如抗原、抗原、标志物等，协助进行诊断。2.检测：ELISA可以用于检测血液中的，如乙型表面、人类缺陷等，用于流行病学调查和临床诊断。3.评估：ELISA可以用于检测后的以及剂量对的化学反应等，帮助对患者进行个性化。4.生物分子检测：ELISA可以用于检测生物分子，如蛋白质、多肽、等，在生物医学研究域广泛应用。总之，酶联吸附法在医学、生物域中具有广泛的应用价值，是临床诊断和中重要的辅助手段。

兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA试剂盒 29

酶联吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或与酶的结合，形成酶标抗原或，保持其活性，同时又保留酶的活性。将抗原或与酶连接成酶标记抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在测定时，把受检标本(含待测或抗原)和酶标抗原或按一定程序与结合在固相载体表面的抗原或起反应形成固相化抗原-酶复合物，用洗涤的使固相载体上形成的抗原-酶复合物与其它成分分离，结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被固相载体上的酶催化生为有色产物，通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待测的含量。

操作步骤

1)涂层:微孔板的孔涂上捕获或抗原。

2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛白蛋白或羧纤维素)，非特蛋

白质结合。

3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或的样本。

4)洗涤:去除未结合的。

5)检测添加:加入对特定抗原有特的酶标记检测。

6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物产生颜色变化。

8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。

9) 读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下)，吸光度

与样本中抗原或的浓度成正比。

标本的采集及保存

1.：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

2.：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

3.细胞物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。) 

结果分析

根据试剂盒提供的品浓度及对应的OD值，利用品绘制的曲线，计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理，通过计算待测样品的浓度。

免责声明

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。

严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。