您的位置:首页 > 技术文献 > 产品说明 > 笃玛生物科狗血清(无菌过滤)
品名 | 规格 | 单价 | 货期 | 订购 | 存储 |
狗血清 | 100ml | 550 | 现货 | 购买 | -5至-20℃ |
狗血清 | 200ml | 860 | 现货 | 购买 | -5至-20℃ |
狗血清 | 500ml | 1800 | 现货 | 购买 | -5至-20℃ |
狗血清采用健康狗血液为原料,经无菌采集、分离、微孔过滤后而成,性状为澄清液体,无噬菌体、低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,适用于试验室或生化科研相关试验,满足不同科研实验的多种需求。狗血源以封闭的穿刺方式采自动物,产品经3次100nm过滤,在净化车间过滤包装。经严格检测确保无支原体,细菌病毒检测依据美国药典(USP)和美国联邦法规第九篇(9CFR),符合国际检测标准。
狗血清和血浆的制备:
狗血清和狗血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:
1.狗血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡后离心(一般为3000rpm,离心5~10min),得到的上清液即为血清,可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分),分装备用。
2. 狗血浆制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液=1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。初用者将上清移至另一清洁容器,吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸,切忌不能吸起细胞成分。
狗血清和狗血浆的主要区别:
1,血浆是离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,其中含有纤维蛋白原(纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用),若向血浆中加入钙离子,血浆会发生再凝固,因此血浆中不含游离的钙离子。
2,血清是离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,其中已无纤维蛋白原,但含有游离的钙离子,若向其中再加入钙离子,血清也不会再凝固。
3, 血浆与血清的另一个区别是:血清中少了很多的凝血因子,以及多了很多的凝血产物。另外,血清中含有特异性免疫抗体(如抗毒素或凝集素)的免疫血清(抗菌素血清)。简单说血浆里含有血清和血细胞
狗血清(无菌过滤),注意事项:有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。
狗血清的解冻:
将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于2~8℃区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用再预温到将使用的温度(如37℃),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
应用
钩端螺旋体外膜蛋白血清学诊断价值和CTB-OmpL1疫苗免疫保护作用评价实验中为提高血清学检测的敏感性和特异性,克隆、表达LipL21,Loa22,LipL32和LigACon4-8,并以这4种重组蛋白为抗原,建立检测马和狗血清中相应抗体的ELISA和狗血清中相应抗体的LUMINEX法,为研制诊断钩体病的新血清学检测方法奠定实验基础。
应用分子生物学方法,构建CTB-OmpL1重组乳酸菌口服疫苗,并利用仓鼠模型评价其免疫保护作用,为研制新型疫苗奠定基础。研究内容与方法:
1.采用PCR方法,从钩端螺旋体基因组DNA中分别扩增LipL21,Loa22,LipL32和LigACon4-8基因片段,构建原核表达载体LipL21-PET28/Rosetta,Loa22-PET28/Rosetta,LipL32-PGEX4T2/BL21,LigACon4-8–PET28/Rosetta,大量诱导表达重组菌,运用Ni+NTA及正负离子吸咐柱纯化获得重组蛋白,用Wester blot鉴定。
2.以重组蛋白LipL21,Loa22,LipL32和LigACon4-8为抗原,建立检测马血清和狗血清中相应抗体的ELISA,用建立的ELISA检测大量临床马血清和狗血清并与传统MAT比较,评价其诊断价值。
3.以重组蛋白LipL21,Loa22,LipL32和LigACon4-8为抗原,建立检测狗血清中相应抗体的Luminex法,检测大量临床狗血清中相应抗体,并与传统MAT比较,评价其诊断价值。
4.用基因工程技术,克隆、表达钩端螺旋体重组蛋白CTB-OmpL1,转入乳酸菌中制备CTB-OmpL1口服疫苗;制备仓鼠钩体感染动物模型,通过该模型评价该口服疫苗的免疫保护作用。
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