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标题FSA胚胎性硫糖蛋白抗原elisa检测试剂盒

   

提供者:上海笃玛生物科技有限公司    发布时间:2024/6/27   阅读次数:9次 >>进入该公司展台
 

产品名称

英文名称

规格

货号

FSA胚胎性硫糖蛋白抗原elisa检测试剂盒

Human fetal sulfoslycoprotein antigen,FSA ELISA Kit

48T/96T

YLS-H1763

用途:科研与实验用试剂,不得用于临床诊断。
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输方面:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货
常见ELISA试剂盒系列:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、值IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等.




 

1. 酶联板:一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用以检测稀释液A 1:100稀释,稀释根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步骤:
实验开始,请提配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用一小时内配制),37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5.         温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.         依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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FSA胚胎性硫糖蛋白抗原elisa检测试剂盒
EDA/Cy5Cy5标记的外胚层1抗体

AFF4/Cy5Cy5标记的淋巴细胞相关AF4样抗体

C6orf191/Cy5Cy5标记的6号染色体开放阅读框191抗体

Cystatin SN/Cy5Cy5标记的胱抑素SN/半胱氨酸酶抑制剂SN抗体

PRMT2/Cy5Cy5标记的精氨酸甲基转移酶2抗体

kappa Opioid receptor/Cy5Cy5标记的kappa型阿片受体抗体

Neurturin/Cy5Cy5标记的神经营养因子抗体

SGTA/Cy5Cy5标记的小谷氨酰胺三角四肽重复区α抗体



ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

关键词:稳定性强  特异性强    灵敏度高  

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