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标题胶原酶A

   

提供者:上海笃玛生物科技有限公司    发布时间:2024/7/30   阅读次数:24次 >>进入该公司展台
  

一般描述

胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。[1]溶组织梭菌 产生六种类型的胶原酶,即α、β、γ、δ、ε和λ。这些胶原酶对结缔组织具有活性,并且对明胶的反应性高于胶原。[2]来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10°C的温度下可从两端消化胶原蛋白。[3]

特异性

胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶,一种胰蛋白酶样酶,以及中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。
酶活性:
胶原酶活性:>0.15U/mg(根据Wünsch)(+ 25℃,4-苯基-偶氮苄-氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染酶活性:胰蛋白酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白水解酶活性
胶原酶A具有平衡的酶活性比例。

应用

来自 溶组织梭菌 的胶原酶被广泛应用于:
  • 分解许多类型的组织(,肺,心脏,肌肉,骨骼,脂肪组织,肝脏,肾脏,软骨,乳腺,胎盘,血管,脑,肿瘤,脐带)
  • 制备但细胞悬浮液用于建立原代细胞培养系统。[4]当产量、活力和功能性很重要时,推荐使用胶原酶A。[5][6]制备来自多种组织的细胞,如肝细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、上皮细胞、肌细胞、内皮细胞 。但是,应根据经验确定各批次的酶是否适用于特定组织的解离。[7][8]

单位定义

内容物
冻干粉,非无菌
单位定义:来自Roche的胶原酶以Wünsch单位表示(在+25°C 下,每分钟使用Wünsch底物生成1 μmol产物)。
通常,胶原酶活性以Mandl单位表示(在+37°C下,在5小时内从胶原中释放1 μmol亮氨酸)。
遗憾的是,两种活性单位之间没有一致的换算因数,因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度,而这是一个不确定变量。实际上,高纯度胶原酶制剂的Mandl单位比酶活要低于粗制胶原酶制剂。梭菌 制剂的换算因数通常约为1:1800(例如 ,批次的 梭菌 胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。

制备说明

激活剂:Ca2+
抑制剂:
胶原酶抑制剂:EDTA,EGTA,Cys,His,DTT,
血清不抑制胶原酶。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂(蛋清、大豆)、血清
工作浓度:0.5至2.5 mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25 °C
罗氏建议仅重新配立即使用所需的冻干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了,所以要避免反复冻融。

重悬

可重悬于任意平衡盐溶液(如,HBSS)

储存及稳定性

保存于密闭容器内,置于干燥通风处

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
装运条件可能会有所不同。

关键词:稳定性强  特异性强    灵敏度高  

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