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技术文章
小动物学习记忆行为检测技术----避暗法
点击次数：153 发布时间：2020/12/23 17:32:44
实验目的
1、学习小白鼠学习记忆行为检测方法
2、学习小鼠避暗自动测试仪的使用方法。
3. 了解影响学习记忆功能的些因素。
二、实验原理
啮齿类动物系夜行性动物，喜欢黑暗的地方，而回避光亮之地。它将设法逃向暗处，此时在暗处给予其电刺激，小鼠会被迫逃回明亮处，并获得记忆。根据此原理设计的实验为次性被动回避反应实验。
被动回避反应(Passive Avoidance Response)为二十世纪60年代后期发展起来的、普遍用于检测小动物学习记忆能力的种动物模型。反应特征：动物须学会躲避可怕的事件，而抑制其本性。被动回避反应有：避暗法（又称步入法step-through test）、跳台法（又称步下法step-down test）等。
三、实验器材
小白鼠常用手术器械、亚**钠、东莨菪碱（scopolamine，Scop.）、生理盐水、35 %酒精。（厂家：北京智鼠多宝生物公司））
四、实验步骤
1. 实验仪器
安徽耀坤生物科技有限公司的小鼠避暗自动测试仪由控制器和活动箱两部分组成，可同时对6只小鼠进行实验。明暗实验箱之间有小门供动物进出，当动物进入暗室被电击时，它可自动记录小鼠**次从明室进入暗室的潜伏期和受到电击的次数，还可通过按键灵活地选择刺激电压和设置实验时间。
2. 实验程序：
2.1适应：将动物头朝室壁放入明室，两室之间的门洞敞开，让动物在两室内自由活动2-3分钟，取出后放回饲养笼。
2.2训练：**天, 将动物放入明室, 它很快钻入暗室, 连接两室的门洞关闭，同时启动电刺激器, 动物足部受电击。如果动物在**次训练时超过100不进暗室, 淘汰之或用手把它轻轻赶进暗室。
记录指标：
（1）记录动物自明室进入暗室的潜伏期，可作为判断给药后动物行为是否有变的个指标。若**致使动物**，则潜伏期显著长于对照组。
（2）记录动物受到电击后的反应，如剧烈嘶叫并跳跃，评为A反应；微弱尖叫，评为B反应；不叫，评为C反应。受到电击后动物般均跳跃。C反应常伴动物跳跃，动物虽不尖叫，但正常动物均能感受电击，显示好的记忆成绩。C反应多见于雄性动物。A反应多见于雌性动物。该记录可作为动物痛域是否变化的个辅助观察指标。
2.3重测试：训练后24小时（第三天），再次将动物放入明室，进行重测试。
记录指标：
（1）记录动物进入暗室的潜伏期，为步入潜伏期（step through latency, STL）。*大潜伏期设为300。
（2）记录动物300内进入暗室的错误次数，包括**次错误进入暗室的次数。
实验设计举例
按照信息论将记忆简单划分为：记忆的获得（也即学习过程、信息的获得过程）、记忆的巩固（信息的保持过程）、记忆的再现（信息的提取过程）时，我们可依此来筛选作用于记忆不同阶段的认知**。
在训练、后或重测给损伤动物记忆的**，可分别观察该**对记忆不同阶段的影响，在此之给动物待检测认知**，即可依据实验结果判断该认知**对抗损伤**的效果。为简化筛选工作，常选用实验步骤较少的小动物学习记忆测试方法，现以步入法为例说明如下。
原创作者：安徽耀坤生物科技有限公司
