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Biotinylated alkaline phosphatase (AP) 生物素化的碱性磷酸酶(AP)
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详细内容
一、基本信息
产品名称:生物素化的碱性磷酸酶(AP)
英文名称:Biotinylated alkaline phosphatase (AP)
产地:西安(如西安齐岳生物科技有限公司等)
规格:1mg, 5mg, 10mg
纯度:99%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏,-20℃
用途:仅用于科研,不能用于人体实验
二、结构特点
生物素化的碱性磷酸酶(AP)是通过将生物素(Biotin)与碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP)进行化学偶联得到的。
碱性磷酸酶是一种膜结合糖蛋白,分子量约140KDa,在自然界中广泛分布,包括原核生物和真核生物。
生物素标记后的碱性磷酸酶能够与亲和素(如Streptavidin或Avidin)结合,形成高亲和力的复合物,便于后续的检测和分析。
三、功能与应用
高酶活性:碱性磷酸酶具有高酶活性,能够高效催化底物反应,产生显著的信号。
广泛应用:适用于多种检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot、免疫组化等。
在ELISA中,生物素化的碱性磷酸酶作为二抗或捕获抗体的标记物,能够与底物反应产生可检测的信号。
在Western Blot中,用于检测蛋白质印迹中的特定蛋白,通过亲和素-生物素系统放大信号。
在免疫组化中,用于组织切片中的抗原检测,结合生物素-亲和素系统,实现高灵敏度的信号检测。
在核酸杂交中,用于标记探针,便于检测目标核酸序列。
四、制备与检测
标记:将碱性磷酸酶与生物素化试剂(如NHS-生物素)反应,通常在适当的缓冲液中进行(如PBS),在室温或4°C下反应数小时。
纯化:通过透析、凝胶过滤或亲和柱等方法去除未反应的生物素化试剂和副产物,获得纯化的生物素化碱性磷酸酶。
检测:在实际应用中,通过与亲和素或链霉亲和素结合,使用适当的底物(如pNPP)进行显色或荧光检测。
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