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水产品中呋喃唑酮残留量的测定--高效液相色谱法
1.范围 5. 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪,配有紫外检测器。 5.2 高速组织捣碎机。 5.3 旋转蒸发仪。 5.3 离心机。 5.4 振荡器。 5.5 蒸发烧瓶,具塞。 5.6 刻度离心管。 5.7 膜孔滤器:0.45μm。 6.色谱条件 6.1 色谱柱:C18柱, 250mm×4.6mm(id),粒度5μm。 6.2 流动相:乙腈+水+磷酸(体积分数为40+60+0.1)。 6.3 流速:0.8mL/min。 6.4 检测波长:365nm。 6.5 柱温:室温。 6.6 进样量:20μL。 7. 样品测定 7.1 试样制备 取鱼、虾、蟹、鳖等水产品可食部分,切成不大于5mm×5mm×5mm的小块后混匀,经高速组织捣碎机捣碎即可,充分混匀。 7.2 提取 称取捣碎样品约10g(精确至0.01g),加25mL二氯甲烷搅拌分散后浸泡15min,在振荡器上振荡5min,提取液经无水硫酸钠柱滤入蒸发烧瓶中,残渣分别用25mL和15mL二氯甲烷按上述方法各重复提取一次,再用15mL二氯甲烷冲洗无水硫酸钠柱,并采用洗耳球吹出柱中液体,滤液均滤入同一蒸发烧瓶中,滤液于旋转蒸发仪上在45℃左右水浴下减压蒸发去除溶剂,蒸发速度控制在每秒一滴。 7.3 净化 用1.0mL流动相和1.0mL正己烷溶解残渣并充分洗涤蒸发烧瓶,将液体移入离心管中,在4000r/min离心5min,用尖嘴吸管移去上层正己烷层,再向离心管中加入1.0mL正己烷,混匀2min,离心,用尖嘴吸管移去上层正己烷层,下层清液经0.45μm膜孔滤器过滤后进HPLC分析。 7.4 测定 7.4.1 呋喃唑酮标准工作液配制 临用前,取呋喃唑酮标准储备液,用流动相稀释成浓度为0.01μg/mL~1.00μg/mL的标准工作液。 7.4.2 液相色谱测定 根据样品液中呋喃唑酮残留量情况,选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样品液中呋喃唑酮响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样品液等体积参插进样进行测定。在上述色谱条件下,呋喃唑酮保留时间约为5.8min。 7.5 空白试验 除不加试样外,按7.2~7.4步骤进行。 8. 结果计算与表述 根据标准工作液和样品液的峰高,按式(1)计算样品中呋喃唑酮残留量: (h-h0)×V×1000 C=Cs × ···································(1) hs×m 式中: C──样品中呋喃唑酮残留量,单位为微克每千克(μg/kg); h──样品液中呋喃唑酮的峰高; hs──标准工作溶液中呋喃唑酮的峰高; h0──空白试验的峰高; Cs──标准工作溶液中呋喃唑酮的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V──样品液*终定容体积,单位为毫升(mL); m──样品的称取量,单位为克(g)。 9. 线性范围、检测限、回收率 9.1 线性范围 本方法的呋喃唑酮标准工作液线性范围为0.01μg/mL ~1.00μg/mL。 9.2 检测限 本方法的检测限为1μg/kg。 9.3 回收率 本方法回收率为72.8%~96.2%。 |
原创作者:天津市兰博实验仪器设备有限公司